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分光光度计校验妙招这些你都知道吗

发布日期: 2021-01-04
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   分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
  分光光度计是精密仪器,正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。
  1.对仪器工作环境的要求
  分光光度计应安装在稳定的工作台上,(周围不应有强磁场, 以防电磁干扰),室内温度应保持在(10~30)℃。室内应干燥,相对湿度宜控制在<85 %,室内应无腐蚀性气体,光线不宜过强。
  2.仪器保养和维护方法
  (1)仪器工作电压一般为220V,允许±10 %的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波动较大的实验室配备稳压器。
  (2)为了延长光源使用寿命,在不用时不用开光源灯。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置,不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。
  (3)单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内,不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必须经常更换干燥剂。
  (4)必须正确使用吸收池,保护吸收池光学面。
  (5)光电转换元件不能长时间曝光,应避免强光照射或受潮积尘。
  分光光度计的检验小妙招
  1.波长准确度的检验:
  分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,
  因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。
  检验波长准确度简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值, 如果测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定, 则需要进行波长调节。
  2.透射比正确度的检验:
  用透射比标准值分别为10 %、20 %、30 %左右的光谱中性滤光片,可见光区分别在440、546、635nm波长处,以空气为参比,分别测量各滤光片的透射比,紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处,以高氯酸溶液为参比,测量其透射比。
  3.稳定度的检验:
  在零点不受光的条件下,用零点调节器将仪器调至零点,观察3分钟读取透射比的变化,即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处,调节零点后,盖上样品室盖(打开光门),使光电管受光,调节透射比为95%(数显仪器调至100%)察3分钟读取透射比的变化,为光电流稳定性。
  4.光的检验:
  可见分光计棱镜式仪器在420nm处,光栅式仪器在360nm处,紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片,以空气为参比,测量其透射比值,即为仪器在相应波长下的杂散辐射率。
  为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。
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