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紫外光分光光度计单双光束区分讲解

发布时间:2022-02-10      点击次数:453
     紫外光分光光度计不能简单得从字面意思去看单双光束。
  虽然两者得概念很容易区分:
  单光束型主要是依赖单束光进行测量,一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
  双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
  还要从光源和检测方法,样品类型,数据管理等多方面出发考虑。
  分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
  为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。
  大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。
  另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。
  紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
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