紫外分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
紫外分光光度计应该如何校准?
1、校准前,应使其开机预热足够时间安稳后进行,一般至少30min后进行。
2、选用规范物质时有必要注意应在规范值的复现条件(即规范物质规则的运用条件)下进行校准,否则会产生错误的校准结果。例如,运用GBW(E)130066分光光度计规范溶液进行校按时,有必要满足两个条件:
(1) 被校准仪器的光谱带宽应该是2nm,若仪器光谱带宽不能调理并大于2nm,则规范溶液给出的值不适用,应该选用修正值;
(2) 校按时所选用的两只石英比色皿应该是内径(10±0.2)mm,并且在235nm、257nm、313nm、350nm处,具有很好的配对性,这样才干复现规范值。
3、运用规范溶液来校按时,还有必要特别注意校准丈量时的实验室温度,因为这些规范物质在不同温度下有不同的透射比规范值。
4、规范用的规范物质有必要在说明书规则条件下保存,例如干涉滤光片应该保在枯燥洁净的环境中,避免表面被污染、受潮开胶或霉变等。一切规范物质均应在证书上注明的有效期内运用。
5、紫外分光光度计选用的中性滤光片规范值的不确定度一定要符合传递规范。校按时,要注意规范滤光片的方向性。