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紫外可见分光光度计法测定苯酚

发布日期: 2010-04-30
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一、实验目的
     1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法
     2、熟悉定性、定量测定的方法
二、实验原理
    紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry),又称紫外吸收光谱法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry),它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波长范围内的吸收光谱。紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁,是研究物质电子光谱的分析方法。通过测定分子对紫外光的吸收,可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。
苯酚是一种剧毒物质,可以致癌,已经被列入有机污染物的黑名单。但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超标,就会产生很大的毒害作用。苯酚在紫外光区的zui大吸收波长λmax=270nm。对苯酚溶液进行扫描时,在270nm处有较强的吸收峰。
定性分析时,可在相同的条件下,对标准样品和未知样品进行波长扫描,通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。在没有标准样品的情况下,可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。
定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值,并绘制标准曲线。再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值,根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂
1.紫外可见分光光度计
2.容量瓶(1000ml250ml
3.比色管(50ml
4.吸量管(5ml10ml
5.苯酚(AR
准确称取苯酚0.010g200ml蒸馏水中,溶解后定量转移到1000ml的容量瓶中,作为储备液。
550ml的比色管中,用吸量管分别加入0.5 ml2ml5ml10ml20ml10ug/ml苯酚标准溶液,用蒸馏水定容至刻度,摇匀。
四、zui大吸收波长的选择
在标准系列溶液中任取一种,以水为参比,分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸收波长,在吸光度zui大值附近以间隔2为单位测定,直至找到zui大吸收波长。
五、标准曲线绘制
在已筛选的zui大波长下,以水为参比分别测定上述标准溶液的吸光度,画出C-A曲线,写出回归曲线方程。
六、苯酚浓度的测定
    在相同情况下,测定其吸光度。根据回归曲线方程计算出待测苯酚浓度。
七、问题讨论
1、紫外可见分光光度法的定性、定量分析的依据是什么?
2紫外可见分光光度计的主要组成部件有哪些?
3、说明紫外可见分光光度法的特点及适用范围。
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